高速不鏽鋼離心機的幾種分離方法:
差速離心:逐次增加離心力,每次可沈降樣品溶液中的一些組份。
差速離心是一種較常用的方法。在這種方法中,離心管在開始時裝滿了均一的樣品溶液。通過在一定速度下一定時間的離心後,就可得到兩個部份:沈澱和上清液。
當高速不鏽鋼離心機离心时,大多数不需要的大颗粒通常会被沉降掉。此时,所需的大部分成分保留在上清液中。然后以更高的速度离心收集的上清液,并沉积所需的颗粒。应适當选择离心时间,以便大部分不需要的较小颗粒保留在上清液中。获得的沉淀物和上清液可以进一步离心,直到达到所需的分离纯度。
密度梯度離心法:可以同時使樣品中幾個或全部組份分離,具有很好的分辨率。
速率區帶法:根據樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沈降速度)。大致步驟如下:
離心管內裝有密度梯度溶液,溶液的密度從離心管的頂部到底部逐漸增加(正梯度)。小心地將待分離的樣品添加到密度梯度溶液的頂部。樣品在梯度溶液表面形成負梯度。由于不同大小的顆粒在離心力的作用下在梯度中以不同的速度運動,離心後會形成幾個獨立的樣品區。
注意:樣品粒子的密度必須大于梯度液注中任一點的密度。離心過程必須在區帶到達管子底部前停止。
等密度離心法(isopycnic):
根據粒子密度的不同。在離心過程中,顆粒移動到與自身相同的密度,形成一個區域。
密度樣品的選擇應確保梯度範圍包括所有待分離顆粒的密度。樣品可以是密度梯度上的液體顆粒或均勻分布在密度梯度上的顆粒。離心後,樣品顆粒達到其平衡點。
注意:平衡後粒子的分離完全由其密度決定,與時間無關,此時再改變離心轉速,只能改變區帶的相對位置。
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